伴刀豆球蛋白A-琼脂糖凝胶

提示：本公司全部产品均为科研实验、试剂盒配制专用试剂，非药品、非食品、非体外诊断试剂，不可用于动物及人体！

伴刀豆球蛋白A-琼脂糖凝胶

（Con A-Berpharose）

1.产品介绍

   伴刀豆球蛋白A-琼脂糖凝胶是一种将伴刀豆球蛋白 A（Con A)与键合在琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质。Con A 是从巨豆中分离出来的一种植物血凝素，能与含有ɑ-D-吡喃甘露糖基、ɑ-D-吡喃葡萄糖基以及与其空间位置相关的分子基团的结合。Con A 与糖类分子结合主要在 C-3、C-4 及 C-6 的羟基部分，Con A 与 D-吡喃甘露糖的结合比与 D-吡喃葡萄糖要强些，主要用于分离和纯化一些糖蛋白、膜蛋白、糖脂、多糖、带甘露糖苷或葡糖苷残基的膜囊泡、lgM、激素脂蛋白等，例如人血清中胰蛋白酶抑制剂、碱性磷酸酯酶、小牛脾磷酸二酯酶、不同变种的甲胎球蛋白和某些激素如绒毛膜促性腺激素（HCG）、促黄体激素（LH）等物质都可以用它纯化。

2.规格

1ml（预装柱）、5ml（预装柱）、20ml、100ml、500ml、1L

3.产品性能

4. 纯化流程

应用举例：

平衡缓冲液：20mM Tris-HCl、0.5M NaCl、1mM CaCl2、1mM MnCl2、pH7.4

结合缓冲液：20mM Tris-HCl、0.5M NaCl、1mM CaCl2、1mM MnCl2、pH7.4

（该填料如需在 pH 小于 5.0下操作，必须Mn2+和 Ca2+的存在时才具有吸附活性）

洗脱缓冲液： 20mM Tris-HCl、0.5M NaCl、1mM CaCl2、1mM MnCl2、0.1M-0.2M ɑ-D-甲

基甘露糖苷（或ɑ-D-甲基葡萄糖苷）、pH7.4

（注：洗脱液中ɑ-D-甲基甘露糖苷或ɑ-D-甲基葡萄糖苷浓度可根据物质吸附能力进行线性或梯度洗脱。甘露糖和葡萄糖亦可以做洗脱物质，但洗脱能力较弱。结合能力较强的物质可采用降低洗脱液 pH 洗脱，但不要低于 pH4.0。可采用硼酸盐作为洗脱液，如 0.1M 硼酸盐，pH6.5。）

（1）平衡：用3-5个柱体积的平衡缓冲溶液进行平衡，观察检测器的变化，直到电导率、 pH值等参数不变。

（2）上样：样品的预处理，样品需至少用0.45μm滤膜过滤，在上样，以免堵塞层析柱。上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择，也可通过线性实验找到较佳上样量。

（3）淋洗：用5-10个柱体积的平衡缓冲液进行淋洗，观察检测器的变化，直到电导率、pH值等参数基本不变。

（4）洗脱：使用 5-10 倍柱体积的洗脱液，收集洗脱峰（部分洗脱方式需中和液中和）。

（5）清洗保存：依次使用 3 倍柱体积的平衡缓冲液液和 5 倍柱体积的去离子水平衡填料，然后保存在等体积的储存缓冲液中，置于 4-8 ℃保存。

5. 在位清洗(CIP)：

填料可以重复使用无需再生，但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集，往往造成流速和结合载量都下降，这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

用 3-4 倍柱体积的含有 0.5M NaCl 的 pH8.5 或 pH4.5 的缓冲液清洗，然后立即用 5 倍柱体积的结合液平衡。

去除结合力较强物质：用 2 倍柱体积的含 1% Triton X-100，pH6.5 的 0.1M 硼酸盐缓冲液清洗，或 20%乙醇或 50%乙二醇溶液清洗，然后立即用 5 倍柱体积的 PBS，pH 7.4 清洗。

6.注意事项：

（1）使用时保证柱子和缓冲液的温度一致，避免柱床内产生气泡，影响纯化效果。

（2）本产品保存条件为4-8℃，严禁冷冻。

（3）运输：4-25℃，常温避光。

（4）仅供科研实验使用。